Ola fìor-ghlan Saposhnikovia divaricata airson coinnle agus siabann a ’dèanamh ola riatanach diffuser mòr-reic ùr airson diffusers losgaidh cuilc

Ola pure Saposhnikovia divaricata airson coinnle agus siabann a ’dèanamh ola riatanach diffuser mòr-reic ùr airson diffusers losgaidh cuilc Ìomhaigh sònraichte

tuairisgeul goirid:

2.1. Ag ullachadh SDE

Chaidh riosan SD a cheannach mar luibh tiormaichte bho Hanherb Co. (Guri, Korea). Chaidh na stuthan planntrais a dhearbhadh gu taxonomically leis an Dr Go-Ya Choi bho Institiud Leigheas Oriental Korea (KIOM). Chaidh sampall eàrlas (àireamh 2014 SDE-6) a thasgadh ann an Herbarium Korean of Standard Herbal Resources. Chaidh riosan tiormaichte de SD (320 g) a thoirt a-mach dà uair le 70% ethanol (le reflux 2 h) agus chaidh an earrann an uairsin a chuimseachadh fo chuideam nas lugha. Tha an decoction air a shìoladh, air a lyophilized, agus air a stòradh aig 4 ° C. B’ e an toradh de chuibhreann tiormaichte bho stuthan tòiseachaidh amh 48.13% (w / w).

2.2. Mion-sgrùdadh air cromatagrafaidheachd leaghan àrd-choileanadh (HPLC).

Chaidh mion-sgrùdadh cromatagrafach a dhèanamh le siostam HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) agus lorgaire raon photodiode. Airson mion-sgrùdadh HPLC air SDE, tha am prìomh-O- chaidh inbhe glucosylcimifugin a cheannach bho Institiud Brosnachaidh Korea airson Gnìomhachas Leigheas Traidiseanta (Gyeongsan, Korea), agusdiog-O-glucosylhamaudol agus 4 ′-O-β-D-glucosil-5-O-methylvisamminol air an dealachadh taobh a-staigh an obair-lann againn agus air an comharrachadh le mion-sgrùdaidhean speactram, gu sònraichte le NMR agus MS.

Chaidh sampallan SDE (0.1 mg) a sgaoileadh ann an 70% ethanol (10 mL). Chaidh sgaradh cromatagrafach a dhèanamh le colbh XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Anns an ìre gluasadach bha acetonitrile (A) agus 0.1% searbhag acetic ann an uisge (B) aig ìre sruthadh de 1.0 mL / min. Chaidh prògram caisead ioma-cheum a chleachdadh mar a leanas: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), agus 20–65% A (23–40 min). ). Chaidh an tonn-lorg lorg a sganadh aig 210–400 nm agus a chlàradh aig 254 nm. B' e an cuibhreann stoc as lugha de 10.0μL. Chaidh fuasglaidhean àbhaisteach airson trì croman a dhearbhadh ullachadh aig dùmhlachd deireannach de 7.781 mg / mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg / mL (4 ′-O-β-D-glucosil-5-O-methylvisamminol), agus 31.125 mg / mL (diog-O-glucosylhamaudol) ann am methanol agus air a chumail aig 4 ° C.

2.3. Luachadh air gnìomhachd an-aghaidh sèidAnn an Vitro

2.3.1. Cultar cealla agus làimhseachadh sampall

Chaidh ceallan RAW 264.7 fhaighinn bho Chruinneachadh Seòrsa Cultar Ameireagaidh (ATCC, Manassas, VA, USA) agus fhàs ann am meadhan DMEM anns a bheil 1% antibiotics agus 5.5% FBS. Chaidh ceallan a ghluasad ann an àile tais de 5% CO2 aig 37 ° C. Gus na ceallan a bhrosnachadh, chaidh meadhan ùr DMEM a chuir na àite, agus lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) aig 1μg/mL a chur ris an làthair no às aonais SDE (200 no 400μg/mL) airson 24 h a bharrachd.

2.3.2. Co-dhùnadh air nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Factar Tumor Necrosis -α(TNF-α), agus Riochdachadh Interleukin-6 (IL-6).

Chaidh ceallan a làimhseachadh le SDE agus am brosnachadh le LPS airson 24 h. CHAN EIL cinneasachadh air a sgrùdadh le bhith a’ tomhas nitrite a’ cleachdadh an reactant Griess a rèir sgrùdadh roimhe [12]. Dìomhaireachd nan cytokines inflammatory PGE2, TNF-α, agus chaidh IL-6 a dhearbhadh a’ cleachdadh pasgan ELISA (siostaman R&D) a rèir stiùireadh an neach-dèanamh. Chaidh buaidhean SDE air NO agus cinneasachadh cytokine a dhearbhadh aig 540 nm no 450 nm a’ cleachdadh Wallac EnVision™leughadair microplate (PerkinElmer).

2.4. Measadh air Gnìomhachd AntiosteoarthritisAnn an Vivo

2.4.1. Beathaichean

Chaidh radain fireann Sprague-Dawley (7 seachdainean a dh'aois) a cheannach bho Samtako Inc. (Osan, Korea) agus an cumail fo smachd le cearcall aotrom / dorcha 12-h aig°C agus% taiseachd. Chaidh radain a thoirt seachad le daithead obair-lann agus uisgead libitum. Chaidh a h-uile modh deuchainneach a dhèanamh a rèir stiùiridhean Institiudan Nàiseanta na Slàinte (NIH) agus chaidh aontachadh le Comataidh Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Oilthigh Daejeon (Daejeon, poblachd Korea).

2.4.2. Inntrigeadh OA le MIA ann an radain

Chaidh na beathaichean a thoirt air thuaiream agus an toirt do bhuidhnean làimhseachaidh mus deach an sgrùdadh a thòiseachadh (gach buidheann). Fuasgladh MIA (3 mg/50μL de 0.9% saline) a chuir a-steach gu dìreach a-steach don àite eadar-articular den ghlùin cheart fo anesthesia air a bhrosnachadh le measgachadh de ketamine agus xylazine. Chaidh radain a roinn air thuaiream ann an ceithir buidhnean: (1) a’ bhuidheann saline gun in-stealladh MIA, (2) a’ bhuidheann MIA le in-stealladh MIA, (3) a’ bhuidheann air a làimhseachadh le SDE (200 mg / kg) le in-stealladh MIA, agus (4) ) am buidheann làimhseachaidh indomethacin- (IM-) (2 mg / kg) le in-stealladh MIA. Chaidh radain a thoirt seachad gu beòil le SDE agus IM 1 seachdain ro in-stealladh MIA airson seachdainean 4. Bha an dosachadh de SDE agus IM a chaidh a chleachdadh san sgrùdadh seo stèidhichte air an fheadhainn a bha air am fastadh ann an sgrùdaidhean roimhe [10,13,14].

2.4.3. Tomhais cuairteachadh giùlan cuideam Hindpaw

Às deidh inntrigeadh OA, chaidh dragh a chuir air a’ chothromachadh tùsail ann an comas cuideam cuideaman droma. Chaidh neach-dearbhaidh neo-chomas (ionnsramaid Linton, Norfolk, RA) a chleachdadh gus atharrachaidhean ann am fulangas cuideam a mheasadh. Bha radain air an cur gu faiceallach anns an t-seòmar tomhais. Chaidh an fheachd cuideam a chuir a’ bhall deiridh an gnìomh gu cuibheasach thar ùine 3 s. Chaidh an co-mheas cuairteachaidh cuideam obrachadh a-mach leis a’ cho-aontar a leanas: [cuideam air a’ bhall-deiridh dheis / (cuideam air a’ bhall-deiridh dheis + cuideam air a’ bhall-deiridh chlì)] × 100 [15].

2.4.4. Tomhais ìrean Serum Cytokine

Chaidh na sampallan fala a chuir a-steach aig 1,500 g airson 10 mionaidean aig 4 ° C; an uairsin chaidh an serum a chruinneachadh agus a stòradh aig -70 ° C gus an tèid a chleachdadh. Tha na h-ìrean de IL-1β, IL-6, TNF-α, agus PGE2 anns an serum air an tomhas le bhith a’ cleachdadh innealan ELISA bho R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) a rèir stiùireadh an neach-dèanamh.

2.4.5. Mion-sgrùdadh cainneachdail RT-PCR fìor-ùine

Chaidh RNA iomlan a thoirt a-mach à clò co-ghlùin glùin a’ cleachdadh an TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), air ath-sgrìobhadh air ais gu cDNA agus PCR-amplified a’ cleachdadh pasgan TM One Step RT PCR le SYBR uaine (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Chaidh PCR cainneachdail fìor-ùine a dhèanamh a’ cleachdadh siostam Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Tha na sreathan primer agus an t-sreath dearbhaidh air an sealltainn ann an Clàr1. Chaidh mion-chomharran de cDNAn sampaill agus an aon ìre de GAPDH cDNA a mheudachadh leis a’ phrìomh mheasgachadh TaqMan® Universal PCR anns a bheil DNA polymerase a rèir stiùireadh saothraiche (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Bha suidheachaidhean PCR 2 min aig 50 ° C, 10 min aig 94 ° C, 15 s aig 95 ° C, agus 1 min aig 60 ° C airson 40 cearcall. Chaidh dùmhlachd gine targaid a dhearbhadh a’ cleachdadh an dòigh coimeasach Ct (àireamh cearcall stairsnich aig crois-phuing eadar cuilbheart leudachaidh agus stairsneach), a rèir stiùireadh an neach-dèanamh.

Prìs FOB:US $0.5 - 9,999 / Pìos

Meud òrdugh as ìsle:100 pìos/pìos

Comas solair:10000 Pìos / Pìosan gach Mìos

Cuir post-d thugainn

Mion-fhiosrachadh toraidh

Bathar Tags

Is e osteoarthritis (OA) an t-eas-òrdugh musculoskeletal as cumanta agus an co-ghalar degenerative as cumanta ann an seann daoine.1]. Tha OA na chumha a tha air adhbhrachadh gu ìre le leòn, call structar agus gnìomh cartilage, agus dì-riaghladh slighean pro-inflammatory agus anti-inflammatory.2,3]. Bidh e gu sònraichte a’ toirt buaidh air cartilage articular agus cnàimh subchondral de joints synovial agus a’ leantainn gu fàilligeadh co-phàirteach, a ’leantainn gu pian air cuideam cuideam a’ toirt a-steach coiseachd agus seasamh [4].

Chan eil leigheas ann airson OA, oir tha e gu math duilich an cartilage a thoirt air ais aon uair ‘s gu bheil e air a sgrios [5]. Is e na h-amasan làimhseachaidh faochadh a thoirt do pian, cumail suas no leasachadh co-ghluasad, neart nan joints àrdachadh, agus buaidhean ciorramach a’ ghalair a lughdachadh. Tha làimhseachadh cungaidh-leigheis OA ag amas air pian a lughdachadh gus co-obrachadh an euslaintich agus càileachd beatha àrdachadh. Ged is e sgrios cartilage am prìomh thachartas ann an OA, is e truailleadh collagen an tachartas bunaiteach a tha a’ dearbhadh adhartas neo-atharrachail OA ann an co-cheangal ri sèid.6,7]. Thathas an dùil gun cuir làimhseachadh le gnìomhachd anti-inflammatory agus chondroprotective faochadh air pian agus cumail suas ionracas matrix ann an euslaintich OA.

Mar sin, tha coltas ann gum bi lughdachadh sèid buannachdail ann an riaghladh OA. Tha sgrùdaidhean o chionn ghoirid a 'moladh dreuchdan dìon airson stòrasan luibheil air adhartas OA, a thaobh a bhith a' lùghdachadh sèid chondrocyte agus tuilleadh sgrios cartilage, tro an comas a bhith ag eadar-obrachadh le stuthan co-cheangailte, a 'ciallachadh gu bheil iad a' lùghdachadh pian co-phàirteach.8].

Bun-stèidhSaposhnikova divaricataChaidh Schischkin (Umbelliferae) a chleachdadh gu farsaing ann an leigheas traidiseanta airson làimhseachadh ceann goirt, pian, sèid agus airtritis ann an Coirèa agus Sìona.9,10]. Na buaidhean cungaidh-leigheis eadar-dhealaichte aigSaposhnikova divaricata(SD) cuideachd a’ toirt a-steach togalaichean anti-inflammatory, analgesic, antipyretic, agus antiarthritic.9,11]. Sheall sgrùdadh o chionn ghoirid gu bheil buaidh aig airtritis antirheumatoid a dh’ fhaodadh a bhith aig earrann cromone SD ann am modail luchag de airtritis air a bhrosnachadh le collagen [10]; ge-tà, cha deach mòran sgrùdaidhean a dhèanamh gus taic a thoirt do ghnìomhachd anti-inflammatory agus antiarthritis deSaposhnikova divaricataearrann (SDE).

Mar sin, rinn an sgrùdadh làithreach sgrùdadh air gnìomhan anti-inflammatory agus antiosteoarthritis de chuibhreann ethanol 70% de SD. An toiseach, chaidh buaidh anti-inflammatory SDE a mheasadhin vitroann an ceallan RAW 264.7 air a bhrosnachadh le LPS. An uairsin, chaidh buaidh antiosteoarthritis SDE a thomhas le bhith a’ measadh cuairteachadh cuideam, truailleadh cartilage articular, agus freagairtean sèid ann am modail radan de monosodium iodoacetate- (MIA-) OA air a bhrosnachadh.